Метод флуоресцентных антител

Дата добавления: 2014-10-02 | Просмотров: 1549

Получают АТ против гормонов белковой природы (АГ могут быть белки м.в. ≥5000) Некоторые гормоны (инсулин, СТГ, гонатропины) обладают видовой специфичностью, поэтому они способны действовать у животных других видов как антигены. Гормоны с меньшим м.в. (адреналин, норадреналин) не имеют видовой специфичности и поэтому не вызывают образование АТ у животных других видов.

Полученные АГ обрабатывают флуорохромом – получаются флуоресцирующие АТ. Такими АТ обрабатывают гистологический срез. Реакция АГ-АТ там, где есть АТ-гормон. Комплекс АГ-АТ в этом случае будет флуоресцировать. Реакция образования этого комплекса высокоспецифична, и поэтому флуоресценция, будет наблюдаться только там, где есть гормон. Именно этим методом удалось установить, что инсулин образуется в β–клетках островков Лангерганса, поскольку при обработке срезов поджелудочной железы флуоресцирующими антителами, специфичными в отношении инсулина, флуоресценция обнаруживается только в них.

Гормоны можно заставить флуоресцировать также другими методами. Например, адреналин и норадреналин исследуют, обрабатывая лиофилизированную ткань формалином. Рассматривая такие срезы при помощи флуоресцентного микроскопа, выявляют местоположение этих гормонов по бледно-зеленой флуоресценции.